RNA提取逆轉(zhuǎn)錄
服務介紹：
細胞中的RNA可分為信使RNA、轉(zhuǎn)運RNA和核糖體RNA三大類，不同組織總RNA提取實質(zhì)就是將細胞裂解，釋放出RNA，并通過不同方式去除蛋白、DNA等雜質(zhì)，最終獲得高純RNA產(chǎn)物的過程。再在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，隨機引物、oligo(dT)或基因特異性引物的引導下合成互補的DNA (complementary DNA，cDNA)。
名稱 | 規(guī)格 | 建議檢測基因數(shù) | 價格（元） |
RNA提取逆轉(zhuǎn)錄 | /樣 | 1-6個基因 | 30 |
/樣 | 7-12個基因 | 60 | |
/樣 | 13-18個基因 | 75 | |
/樣 | 19個及以上基因 | 詢價 |
實驗流程：
取材-RNA提取-測濃度-逆轉(zhuǎn)錄成cDNA
其中mRNA、lncRNA、circRNA為普通逆轉(zhuǎn)錄；
miRNA采取特異性逆轉(zhuǎn)錄(需提供基因名稱和種屬，方便設(shè)計引物用于特異性逆轉(zhuǎn)錄 )，默認做莖環(huán)法的逆轉(zhuǎn)錄，如需做加尾法逆轉(zhuǎn)錄請?zhí)貏e備注說明。
送樣運輸要求：
1. 樣品處理
a) 動物組織：常規(guī)組織100mg，脂肪組織，結(jié)締組織，纖維化組織適當增加。將組織剪切成合適大小后（建議組織塊長寬高均不大于0.5 cm），然后迅速完全浸泡于5～10倍體積的RNAsolid™試劑中。（注意：已浸入RNAsolidTM試劑中的組織經(jīng)平衡一段時間后，可從溶液中取出，切成更小的組織塊，再重新放回RNAsolidTM試劑中；有些比較弱的液體滲透性組織如骨頭等，不適合用RNAsolidTM試劑進行RNA保護。）
b) 植物組織：新鮮的葉、果肉、種子最少100 mg。將嫩葉，嫩莖組織切成合適的大?。ńㄗh長寬高均不大于0.5 cm）后，然后迅速完全浸泡于5～10倍體積的RNAsolidTM試劑中。（注意：某些植物組織天生具有的屏障，如葉子表面的蠟層可阻礙RNAsolidTM試劑的滲透，對于此類組織，通常需破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。）
c) 細胞等樣本：收集不少于10^6個細胞沉淀（用PBS清洗1-2次），干冰運輸。
d) 酵母、細菌等樣本：離心棄上清，收集一定量的菌體沉淀，干冰運輸。
e)全血：最少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管，干冰運輸。
f)血清或血漿：最少1 mL，干冰運輸。
g)RNA樣品： OD260/280為1.8-2.0，濃度≥100 ng/μL，體積≥20μL，干冰運輸。
2. 樣品保存及運輸
加入有RNAsolidTM試劑的樣本可在37℃保存1～2天，2天以后部分組織中的RNA會開始降解。室溫（25℃）穩(wěn)定保存1周，不會有明顯的RNA降解發(fā)生。大部分樣品置于RNAsolidTM試劑中，4℃條件下可穩(wěn)定保存1個月，不會有明顯的RNA降解發(fā)生。長期存放可先將保存在RNAsolidTM試劑中的樣本4℃浸透過夜，然后將RNAsolidTM試劑吸出棄去，再將樣本放入-20℃或-80℃長期穩(wěn)定保存3～5年。
