野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒操作總結(jié)
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：96T10ng/L-245ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定兔血清、血漿、尿液及相關(guān)液體樣本中轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中兔轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)水平。用純化的兔轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)，再與HRP標記的轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光（OD值），通過標準曲線計算樣品中兔轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)濃度。
試劑盒組成
130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（480ng/L）0.5ml×1瓶
3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶
4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
240ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
120ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
60ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
30ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
15ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
