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上海科順生物科技有限公司

主營產(chǎn)品: elisa,生物試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體

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公司信息

聯(lián)人:
李經(jīng)理
址:
上海市浦東新區(qū)張楊北路5972號
編:
鋪:
http://www.aiynx.com/st177429/
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人活化*X(FXa)ELISA試劑盒說明書

2020-3-2 閱讀(111)

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒
英文簡稱Human activated blood coagulation factor X (FXa) ELISA kit

產(chǎn)品貨號:KS14773

品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催下轉(zhuǎn)成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個

1個

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧物酶的(HRP)活性。

 

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒操作步驟

  • 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒注意事項

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請避光保存。
  • 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                  

人活化*X(FXa)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS15746 大鼠白介素2可溶性受體(IL2sR)ELISA試劑盒

KS15747 大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒

KS15748 大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒

KS15749 大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒

KS15750 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒

KS15751 大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒

KS15752 大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒

KS15753 大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)ELISA試劑盒

KS15754 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒

KS15755 大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒

KS15756 大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒

KS15757 大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒

KS15758 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒

KS15759 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒

KS15760 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKSα)ELISA試劑盒

KS15761 大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒

KS15762 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒

KS15763 大鼠核因子κB(NFκB)ELISA試劑盒

KS15764 大鼠D乳酸脫氫酶(DLDH)ELISA試劑盒

KS15765 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒

KS15766 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒

KS15767 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒

KS15768 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒

KS15769 大鼠*(CH)ELISA試劑盒

KS15770 大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒

KS15771 大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒

KS15772 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2MG)ELISA試劑盒

KS15773 大鼠L鼠乳酸脫氫酶(LLDH)ELISA試劑盒

KS15774 大鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒

KS15775 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA試劑盒

KS15776 大鼠*釋放激素受體抗體(GNRHRAb)ELISA試劑盒

KS15777 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒

KS15778 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA試劑盒

KS15779 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWFcp)ELISA試劑盒

KS15780 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒

KS15781 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒



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