CdTe量子點修飾功能性小分子（谷胱甘肽-巰基乙酸和鏈酶親和素)抗體
谷胱甘肽-巰基乙酸共修飾的CdTe量子點
描述：
量子點( quantum dots，QDs)，其熒光光譜特征受粒子表面性質(zhì)的影響很大，它們在熒光分析中的研究應(yīng)用越來越多的引起了人們的關(guān)注。溶菌酶( Lysozyme，LYSO)，臨床用于慢性鼻炎、急慢性咽喉炎等。研究說明了谷胱甘肽-巰基乙酸共修飾的Cde量子點與溶菌酶YSO)的相互作用。
結(jié)果表明，GSH-TGA-CdTe量子點對溶菌酶(LYSO)內(nèi)源熒光有較強的猝滅作用，量子點與LYSO之間有的能量轉(zhuǎn)移，且量子點與LYSO形成配合物。圖1C是LYSO中分別加入不同濃度QDs的CD譜。加入Cde量子點后，208m處負槽的強度逐漸變大，說明QD。的加入會使LYSO結(jié)構(gòu)中a-螺旋的程度增加，從而LYSO的二級結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化
制備方法：
巰基乙酸(TGA)修飾的殼核型CdTe/CdS量子點:利用水熱法合成了巰基乙酸(簡稱TGA)修飾的CdTe/CdS殼核型量子點(TGA-CdTe/CdS QDs)及谷胱甘肽(簡稱GSH)修飾的CdTe量子點(GSH-CdTe QDs)。利用透射電鏡(簡稱TEM)表征量子點的形貌,采用熒光光譜(簡稱FL),紫外-可見吸收光譜(簡稱UV-vis)等方法研究量子點與蒽醌類化合物(大黃酸,大黃素和大黃酚)及金屬銅離子間的相互作用。
1、分子光譜法研究大黃酸和大黃素與TGA-CdTe/CdS QDs間的相互作用及其分析應(yīng)用
合成了TGA-CdTe/CdS QDs水溶性量子點。通過分析TGA-CdTe/CdSQDs與大黃酸(或大黃素)之間相互作用的熒光光譜圖和紫外-可見吸收光譜圖,發(fā)現(xiàn)當激發(fā)波長為350 nm時,大黃酸和大黃素均可猝滅TGA-CdTe/CdS QDs位于570 nm處的熒光峰的熒光。TGA-CdTe/CdS QDs的熒光猝滅強度在范圍內(nèi)與加入的大黃酸(或大黃素)的濃度成線性關(guān)系?；诹孔狱c對大黃酸和大黃素的熒光傳感,提出了一種以TGA-CdTe/CdS QDs為熒光探針便捷、靈敏檢測大黃酸和大黃素含量的熒光光譜法。在*條件下,對于大黃酸和大黃素體系來說,線性范圍和檢出限(3σ/S)分別為:0.09650~60μg·mL-1(0.0289μg·mL-1)和0.1175~70μg·mL-1(0.0352μg·mL-1)。該方法在人體尿樣中成功的檢測出了大黃酸和大黃素的含量。綜上所述,提出了一種靈敏檢測大黃酸和大黃素含量的方法。
2、基于谷胱甘肽修飾的CdTe量子點利用熒光猝滅法定量檢測大黃酚
合成GSH-CdTe QDs。利用熒光光譜和紫外-可見吸收光譜探究了大黃酚與GSH-CdTe QDs間的相互作用。由于大黃酚與GSH-CdTe QDs之間發(fā)生了電子轉(zhuǎn)移,當向體系中加入谷胱甘肽后,GSH-CdT QDs的熒光被猝滅且GSH-CdT QDs的熒光強度的猝滅程度與大黃酚的濃度呈線性關(guān)系。在實驗條件下,GSH-CdTe QDs熒光強度被猝滅的線性范圍和線性相關(guān)系數(shù)分別為:0.010~20μg·mL-1和0.9918,檢出限(3σ/S)為0.0030μg·mL-1。該方法成功的在合成樣品中檢測大黃酚的濃度。
鏈酶親和素修飾的CdSe/ZnS量子點
量子點標記的鏈霉親和素(QS系列產(chǎn)品)由鏈霉親和素與帶官能團的活性量子點共價偶聯(lián)得到。鏈霉親和素與有高度的親和力與性，利用-親和素系統(tǒng)，將量子點標記的鏈霉親和素與化的抗體、核酸、受體結(jié)合，可把量子點標記到細胞、核酸、上進行示蹤檢測及功能研究，為量子點的應(yīng)用提供一種通用的標記物。其應(yīng)用范圍包括：顯微成像、蛋白印跡、流式細胞及動態(tài)示蹤。
摘要：
目的:探討鏈霉親和素修飾的CdSe–ZnS量子點對聚合酶鏈反應(yīng)的影響。
方法:將鏈酶親和素修飾的量子點濃度進行稀釋觀察其對于聚合酶鏈反應(yīng)體系的濃度效應(yīng);反應(yīng)體系中含有濃度的鏈酶親和素修飾的量子點,在不同的退火溫度下進行擴增,觀察鏈酶親和素修飾的量子點對退火溫度的影響;將不同濃度的BSA加入到含有濃度的鏈酶親和素修飾的量子點的反應(yīng)體系中,觀察BSA的影響作用;將不同的Taq酶與不同濃度鏈酶親和素修飾的量子點組合,觀察對擴增體系的影響。
結(jié)果:濃度鏈霉親和素修飾的量子點可以聚合酶鏈反應(yīng)的擴增效率,拓寬PCR的退火溫度范圍;BSA可以逆轉(zhuǎn)鏈霉親和素修飾的量子點對于PCR的優(yōu)化作用;量子點可能是與Taq酶相互作用,來影響PCR的擴增效能
結(jié)論:濃度的鏈霉親和素修飾的量子點可以優(yōu)化PCR的反應(yīng)體系。
1.1株金色葡球閑9
1.2主要試劑量子點SA- Cdse/ns525。PCR反應(yīng)試劑。
1.2方法
1.2.1PCR擴增在高壓火菌的 Eppendoff管中，50l的反應(yīng)體系，其中含有50mmol/LKC，10mmol/LTisC，1.5mmol/.Mg(2和0.4mmol/I.的dNTP混合物，上游和下游引物均為0.2ml/L，DNA聚合酶0.02U/ul，鏈親和素修飾的量子點的用量依據(jù)實驗需要確定。在PF2400PCR擴增儀上進行循環(huán)擴增。量子點的濃度進行系列優(yōu)化，觀察其對PCR擴增的影響，對退火溫度進行系列調(diào)整觀察其対PCR擴增的影響。
1.2.2擴増產(chǎn)物檢測將擴增后的 Eppendol管離心后，取5u上清液在1.5%的瓊脂糖凝膠含0.5g/ml.B)中，于1xTBE緩沖液中電泳.在生物電泳圖像分析系統(tǒng)觀察結(jié)果并照相。
2結(jié)果
2.1不同濃度的SA-CdSeZ.nS525量子點對PCR擴增結(jié)果的影響
將SA- Cdse/ns525量子點的濃度進行系列稀釋，使其在50PCR反應(yīng)體系中的終濃度分別為0. 2 nmol/L: 0.4 nmol/L: 0.6 nmol/: 0. 7nmol/0.8mmol/，分別加入到PCR反應(yīng)體系中，DNA聚合酶0.02U/l，觀察其對擴增體系的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)擴增體系中含有量的鏈親和素修飾的量子點可以擴增效能。
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