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     昨天我司的吳在頁(yè)面留言中看到了一個(gè)新手朋友的求助。

     客戶：我用ELISA雙抗夾心的方法檢測(cè)NGF，做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)值很低，搞不懂是什么原因造成的，我是新手不知是否有些細(xì)節(jié)自己沒(méi)有注意到

     吳：如果試劑盒很貴，自己又沒(méi)有操作過(guò)建議找專也人員幫你做！

     客 戶：試劑盒是很貴，不過(guò)我還是希望自己能做出來(lái)。

     吳：你用的是人血清還是組織勻漿？注意滴加計(jì)量的把握！查過(guò)文獻(xiàn)嗎？它在你的組織中表達(dá)是否較高？

     客戶：我要檢測(cè)的是細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)胞分泌的蛋白量，表達(dá)量不高，作出來(lái)的幾個(gè)曲線很不標(biāo)準(zhǔn)，線性關(guān)系不明顯，我不知道是為什么。

     吳：ELISA 是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè)，既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA 的影響因素較多，加強(qiáng)質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。一般加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法 ELISA ）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1 分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。垂直加入,避免漏吸或少吸,洗滌時(shí)避免串孔等等諸多值得注意的地方.所以一定要多加練習(xí)!

     相信經(jīng)過(guò)吳的全面解析這位朋友下次的實(shí)驗(yàn)一定會(huì)成功的。

     我公司是一家科學(xué)檢驗(yàn)、研發(fā)和銷售為一體的生物技術(shù)型公司，公司成立以來(lái)跟諸多高等院校、科研院所有所合作。選購(gòu)elisa試劑盒首先上海恒遠(yuǎn)生物公司